ترانسفکشن سلولهای کبدی بهوسیله dna کلون شده ویروس هپاتیت b و ارزیابی میزان رونویسی و بیان نشانگرهای اختصاصی ویروسی و ژنهای القا کننده اینترفرون
نویسندگان
چکیده
هدف: با توجه به اینکه واکسن موثری علیه ویروس هپاتیت b(hbv) وجود دارد، شیوع جهانی عفونت با این ویروس کاهش چشمگیری پیدا نکرده است.hbv برخلاف بسیاری از ویروسهای بیماری زا در انسان قابلیت کشت در آزمایشگاه را ندارد. اما ترانسفکشن سلولهای کبدی با منشا انسانی بوسیله پلاسمید کد کننده ژنوم کامل hbv می تواند منجر به تولید ویروس عفونی گردد. در صورت راه اندازی و بهینه سازی کشت سلولی، تکثیر ژنوم ویروس در این سلولها را می توان با استفاده از pcr تشخیص داد، همچنین ترشح آنتی ژن سطحی ویروس بوسیله الایزا قابل اندازه گیری است. ژنهای القاء کننده اینترفرون(isgs) در پاسخ به درمانhbv با داروی اینترفرون آلفا بیان می شوند، در نتیجه اندازه گیری این ژنها می تواند در موارد عدم پاسخ دهی به این دارو موثر باشد. در نتیجه در مطالعات دارویی علاوه بر تشخیص اثر ماده مورد نظر بر شاخصهای ویروسی، با سنجش isg ها می توان اثر دارو را نیز در فعال سازی ایمنی ذاتی علیه hbvمورد بررسی قرار داد. مواد و روشها: در این مطالعه ترانسفکشن سلولهای کبدی huh-7 بوسیله پلاسمید pch-9/3091 انجام شد و سپس بیان hbsag و همچنین تولید mrna های ویروسی مورد بررسی قرار گرفتند. علاوه بر این با استفاده از آغازگرهای شناسایی کننده isg ها، روش شناسایی آنها راه اندازی و بهینه سازی شد. نتایج: سلولهای huh-7 از تکثیر hbv حمایت می کنند. انجام الایزا بر روی مایع رویی سلولها بیشترین میزان hbsag را در 72 ساعت پس از ترانسفکشن تایید می کند. با استفاده از آغازگرهایی که برای نواحی s و pg/pc طراحی شده، رونویسی و تکثیر ژنوم ویروس نشان داده شد. نتایج pcr با استفاده از پرایمرهای isg بر روی سلولهای ترانسفکت شده با پلاسمید ویروسی نشان داد که ممکن استhbv در بالا بردن میزان isg ها در سلولهای huh-7 نقشی نداشته باشد. نتیجهگیری: یافته ها نشان داد این سیستم می تواند راه حلی باشد در جهت مطالعه بر روی عملکرد ژنوم ویروس، آزمایش دارو ها و واکسنهای جدید و همچنین بررسی مکانیسم های مقاومتهای دارویی که در حال حاضر پاسخ به داروهای کنونی از جمله اینترفرون آلفا را با مشکل مواجه نموده است.
منابع مشابه
Immune and non-immune assays
تاسياقلما فلتخم ىلع ءوضلا ضعب ءاقلإ تم ةعجارلما هذه يف دضتسلماب دضلا تلاعافت ىلع دمتعت يتلا ةموسولما ةيعانلما ةيعانلما و ،ةيقلأتلا ةيعانلما تاسايقلما لمشت يتلاو Ag-Ab هذه فيرعت تم .)EIA, ELISA( ةييمزنلإا ةيعانلما و ،ةيعاعشلا و تلاعافتلا أدبلم رصتخم فصو عم لًاوأ ةثلاثلا تاسياقلما اهروطت حيضوتل يخيراتلا جردتلا بسح تشقون مث ،تاقيبطتلا امك .لماك لكشب ةيلآ ةينقت ىلإ ةياهنلا يف داق يذلا يجيردتلا ةخطلل...
متن کاملThe Effects of 8 Weeks of Vitamin C Intake and Regular Aerobic Exercise on Serum Brain-Derived Neurotrophic Factor and Insulin-like Growth Factor-1 Levels in Obese Girls
شور و داوم اه : ،یبرجت همین قیقحت نیا رد 28 نیماتیو ،نیرمت ،لرتنک هورگ راهچ هب یفداصت روط هب و باختنا قاچ رتخد C یبیکرت و دندش میسقت . نیرمت تدش اب يزاوه 50 ات 70 ،رثکادح بلق نابرض دصرد 3 تدم هب و هتفه رد هسلج 8 هتفه دش ماجنا . هورگ ياه نیماتیو C و صرق یبیکرت 500 یلیم نیماتیو یمرگ C ار 3 فرصم هتفه رد راب دندومن . هنومن و لبق اتشان ینوخ ياه 48 هلخادم نیرخآ زا سپ تعاس اه عم...
متن کاملThe Effect of Depression and Anxiety on the Outcome of Assisted Reproductive Technology (ART)
Address: Department of Gynecology and Obstetrics, Montasariya Infertility Center, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran Tel: +98 511 8534021 Email: [email protected] همدقم : ناـمز رد نز بارطـضا حطـس لـثم يرـيغتم لـماوع هب هتسباو دناوت يم يروراب كمك نامرد تيقفوم دشاب نامرد . راب نانز بارطضا و يگدرسفا ريثات يبايزرا يارب هعلاطم نيا يروراـب كـمك ناـمرد دمايپ رب رو تسا هدش يحارط ...
متن کاملThe Effect of Astrocytic S100B Protein on Memory Conolidation Rats
همدقم : نیئتورپ S100B ورون طابترا لرتنک رد و دوش یم دازآ اه تیسورتسآ زا هک تسا ینیئتورپ ، لگ ی یلا دراد شـقن یسپانیس يریذپ لکش و هظفاح رد لاامتحا و . هـعلاطم ادروخرب یصاخ تیمها زا نورون و تیسورتسآ لولس ود يدرکلمع طابترا تسا ر . ياـه شوـم رد يریگداـی يور رـب پـماکوپیه نورد هـب نیئتورـپ نیا قیرزت رثا رضاح هعلاطم رد تفرگ رارق یسررب دروم ییارحص . شور اه : زا قیقحت نیا رد 40 دش هدافتسا رن ییا...
متن کاملساخت و ارزیابی یک سازه ی dna بیان کننده ی پروتئین core ویروس هپاتیت c متصل به آنتی ژن s ویروس هپاتیت b به عنوان یک کاندید واکسن
مقدمه: با وجود این که ویروس هپاتیت c (hepatitis c virus یا hcv) یکی از عوامل مهم ایجاد کننده ی بیماری های مزمن کبدی می باشد، هنوز واکسن مناسبی برای آن تهیه نشده است. هدف از این مطالعه، ساخت یک سازه ی بیان کننده ی توالی core (aa: 1-122) ویروس هپاتیت c متصل به آنتی ژن s ویروس هپاتیت b (hbsag یا hepatitis b surface antigen) و تأیید بیان آن در سلول های یوکاریوتی بود. روش ها: در ابتدا توالی core ا...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
پژوهش های آسیب شناسی زیستیجلد ۱۶، شماره ۳، صفحات ۶۵-۷۹
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023